Реактивы и среды Sigma для работы в ЭКО лабораториях
- Главная страница
- Пресс-центр
- Реактивы и среды Sigma для работы в ЭКО лабораториях
Экстракорпоральное оплодотворение преовуляторных ооцитов и транспортировка дробящихся эмбрионов в полость матки пациентки (метод ЭКО и ПЭ) — современный способ лечения бесплодия. Получение ооцитов, подготовительные работы к их оплодотворению являются важными этапами in vitro оплодотворения.
Компания Sigma имеет в ассортименте большой выбор реактивов и сред, предназначенных для манипуляций с ооцитами и прошедших доклинические испытания.
На этапе подготовки ооцитов к in vitro оплодотворению важно подобрать культурную среду, максимально схожую с естественными жидкостями пациента.
Культурные среды М16 и М2 от Sigma предназначены для получения ооцитов в CO2-инкубаторе и дальнейшей работе с ними в условиях нормальной атмосферы. Все среды подвергнуты стерилизующей фильтрации, а также прошли тесты на предмет присутствия эндотоксинов, способных оказывать негативное влияние на эмбрионы. Контроль значения pH осуществляется благодаря бикарбонатному буферу в М16 и HEPESa в среде М2.
Составляющие культурных сред Sigma:
- антибиотики: HEPES, альбумин, калиевая соль G пенициллина и др.;
- субстраты энергетические: лактат, глюкоза, пируват и др.
В качестве основы для получения культуральных сред используется стерильная вода, прошедшая испытания на предмет присутствия эндотоксинов.
Минеральное масло может использоваться для получения ооцитов, а также при инъекционном введении сперматозоида в яйцеклетку (метод ИКСИ). Оно наносится на капли со средой и ооциты. У Sigma представлены два типа масел для метода ЭКО: M5310 (стерильное) и M8410 (нестерильное). Испарение жидкости из воды происходит медленнее при работе в масляной среде. В культурную среду не попадают микроорганизмы и частицы пыли. Масло позволяет производить манипуляции в каплях малого размера, что имеет большое значение при оплодотворении невысоким числом активных сперматозоидов.
Метод интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ИКСИ) используется, если мужское бесплодие имеет тяжёлую форму. Перед началом оплодотворения ооциты очищают от кумулюса с помощью гиалуронидазы. Этот фермент вызывает лизис внеклеточного матрикса, соединяющий клетки кумулюса.
В ассортименте компании Sigma представлен поливинилпирролидон (PVP), использующийся в методе ИКСИ. Сперма, прошедшая обработку, соединяется с каплями PVP. Сперматозоиды начинают двигаться в 2-3 раза медленнее в результате повышения вязкости среды. Это, в свою очередь, упрощает контроль над ними.
Расхождение Zona Pellucida представляет собой значимое событие преимплантационного развития эмбриона in vivo. В последующем эмбрион начинает контактировать с маточным эндометрием. Но при нахождении in vitro бластоциста порой неспособна стать свободной от Zona Pellucida.
Могут возникнуть проблемы, главным образом у возрастных пациенток с неоднократными и неудачными результатами трансплантации эмбрионов, а также при замедленном развитии и неблагоприятном морфогенезе с аномальными биометрическими параметрами Zona Pellucida.
Метода вспомогательного хетчинга (ВХ) позволяет нарастить периодичность имплантации у пациенток, которые лечатся от бесплодия путём ЭКО. В качестве среды для проведения метода ВХ используют раствор Тироде. На 2-3 день с момента аспирации фолликулов в Zona Pellucida создают отверстие диаметром 20-30 мкм.
Ниже представлены все среды и реактивы, предназначенные для использования в разных ЭКО-ПЭ процедурах. Все продукты являются высокой степени очистки и испытания на эмбрионах.
Каталожный № | Название | Описание | Использование |
M7292 | Культуральная среда M 16 |
жидкость; |
Для культивирования ооцитов, эмбрионов в СО₂-инкубаторе |
M7167 | Культуральная среда M 2 |
жидкость; |
Для манипуляций с ооцитами при комнатной атмосфере |
M5310 | Минеральное масло |
плотность 0,82-0,88 г/мл; |
Предотвращает высыхание культуральной среды |
M8410 | Минеральное масло |
белое, плотность 0,84 г/мл; |
Предотвращает высыхание культуральной среды |
G6152 | Глюкоза |
порошок, смесь аномеров; |
Энергетический субстрат в культуральных средах |
L7900 | Лактат натрия |
сироп, 60% w/w, без глюкозы; |
Энергетический субстрат в культуральных средах |
P4562 | Пируват натрия |
порошок, чистота более 99%; |
Энергетический субстрат в культуральных средах |
P4687 | Калиевая соль пенициллина G |
порошок, 1440-1680 Ед/мг; |
Антибиотик, добавляется в культуральные среды |
S1277 | Стрептомицина сульфат |
более 98%; |
Антибиотик, добавляется в культуральные среды |
A3311 | Альбумин (фракция V) |
порошок, чистота более 96%; |
Добавляется в культуральные среды как источник белка |
H6147 | HEPES |
порошок, pKa (25°C) – 7,5; |
Добавляется в культуральные среды для регулирования pH вне инкубатора |
W1503 | Стерильная вода |
жидкость; |
Манипуляции с эмбрионами, основа культуральных сред |
H4272 | Гиалуронидаза |
порошок, тип IV-S, асептичен; |
Для отмывания ооцитов от клеток кумулюса |
P0930 | Поливинилпирролидон (PVP) |
порошок; |
В процедуре ICSI для замедления движения сперматозоидов |
T1788 | Раствор Тироде |
жидкость; |
Для удаления Zona Pellucida |
и приглашать на предстоящие выставки и семинары